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你知道单克隆抗体和多克隆抗体的区别吗?

更新时间:2024-07-17      浏览次数:128

一、什么是抗体?
机体受抗原刺激后,由淋巴系统的细胞(主要是B淋巴细胞分化后的浆细胞)产生具有特异性免疫功能球蛋白,即抗体。抗体蛋白是一个由四条多肽链(两条重链,两条轻链)而组成的Y型分子。该Y型结构的两个顶端处各含有一个抗体结合部位(paratope, 可以理解成是一把“锁“)。每一种抗体结合部位可以特定地结合一种抗原表位(epitope, 可以理解成针对某一把“锁"的 “钥匙")。抗体结合表位与抗原表位这种特异对应关系是抗体与抗原高特异性结合的基础。抗体在医药研发中有非常广泛的应用。目前主要有两大类的抗体:单克隆抗体(monoclonal antibody, Mabs)和多克隆抗体(polyclonal antibody, Pabs)


二、单克隆抗体和多克隆抗体有什么区别?

1.定义的区别:

克隆:指无性繁殖,即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系,该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。

单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb):是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。

多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb):顾名思义,由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混在一起就是多克隆抗体。简言之,多克隆抗体就是用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物,刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体的混合物。


2.性质上的区别:

特异性:

多克隆抗体犹如许多单克隆抗体的集合,它们有的特异性高,有的特异性低,总体特异性符合正态分布曲线的形式,而其特异性的总体表现也应处于统计学正态曲线中位线(MID)的水平。而单抗制备后续的筛选过程,可去除大部分的非特异抗体,保留几株特异性较好的单克隆抗体。 

一般而言,单克隆抗体具有更高的特异性。多抗特异性可通过生产环节比如使用高纯度的免疫原,以及使用提纯的靶点蛋白对多抗进行免疫亲和层析纯化等方法得以改进。经过免疫亲和层析的多抗其总体特异性将大大提升,与单抗相比已相差无几。


交叉反应:

抗原与抗体结合的特异性,是指某一抗原表位与相应抗体结合的特异性。这种结合的分子机制是抗原表位的空间结构与抗体分子超变区互补的结果。而交叉反应是指两种抗原分子表面存在有相同或相似的抗原表位时,与同一种抗体结合的现象。因此,交叉反应实质上也是抗原与抗体的特异性结合。

单克隆抗体仅针对目标抗原某一特定抗原表位,特异性高,存在有相同或相似的抗原表位几率低,出现交叉反应的几率也就低。

多克隆抗体针对目标抗原多个抗原表位,特异性低,具有生物物理多样性,存在有相同或相似的抗原表位几率高,出现交叉反应的几率也就较高。


假阳性:

根据抗体最核心的表位结合区域—互补决定区(Complementarity Determining Region,CDR)的结构,抗体通常可以紧密结合的抗原表面区域或表位面积很小,对于变性的肽段约在4-8个Aa以内,以及5-7个单糖的糖链或6-8个核苷酸的核酸。通过肽段BLAST可以得知,小肽段序列相同的情况将在很多不同蛋白上发生。这意味着单抗识别的这个表位可能并不仅仅属于靶标蛋白本身,也即意味着,即使利用纯化抗原蛋白进行了特异性筛选的单克隆抗体,当用其检测复杂样本时,也将面临交叉反应或假阳性问题。


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