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明胶酶谱法检测试剂盒除了用于血液检测,还能用于什么样本呢?

更新时间:2026-05-27      浏览次数:7

1.产品简介:

基质金属蛋白酶 (MMP) 属于金属蛋白酶家族,该家族由至少 20 个成员组成,并且已知参与细胞外基质蛋白的代谢。基质金属蛋白酶是一类活性依托锌、钙离子发挥作用的蛋白水解酶,在生物体内分布广泛。这类酶核心作用为分解代谢细胞外基质物质,深度参与胚胎生长发育、机体组织修复、创面愈合以及血管新生等生理活动,保障机体组织形态与结构维持正常状态。该物质的活性水平处于动态调控之中,一旦表达量与活性出现异常紊乱,就会损伤组织固有屏障。其功能失调和肿瘤侵袭转移、关节病变、血管硬化、器官纤维化等诸多病症息息相关,酶与体内抑制物质相互制衡,共同守护机体生理运作平衡。MMP 可通过酶谱法广泛检测。本试剂盒提供了一个简单的酶谱电泳系统,用于检测血液、体液、分泌物、细胞裂解液、细胞培养基等样品中的MMP2,MMP9酶谱及活性。


2.检测原理:

本方法借助 SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳联合凝胶染色技术,能够同步检测 MMP-2、MMP-9 活性以及无活性前体酶原谱系,检测灵敏度可达nM级别,检测性能优于 ELISA 检测方式。

实验预先制备混合明胶底物的电泳凝胶,将待测生物样本加入凝胶体系完成电泳分离。电泳体系内的SDS可与基质金属蛋白酶可逆结合,破坏蛋白空间构象,暂时抑制酶的水解活性,保障蛋白依据分子量差异完成有效分离。电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育,MMP恢复活性,凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,从而能同时指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶谱)及活性。


3.检测目的:

本试剂盒主要用于检测相关的组织、细胞中MMP-2、MMP-9 酶谱活性。

本试剂盒可进行50 次标准胶检测,如果每块胶加样孔可以10个以上,总体可以检测500个样本以上。


4.试剂盒组成:

1.凝胶基底液 A(10X)50ml-20℃保存需稀释10倍使用

2.洗涤液B液(10X)50ml 4 ºC保存需稀释10倍使用

3.孵育液C液(10X)50ml 4 ºC保存需稀释10倍使用  

4.上样缓冲液 D液(2X)1.5ml-20℃保存

5.考马斯亮蓝染色液 E液50ml 4 ºC保存


备注: 以上10倍稀释可以采用蒸馏水进行稀释


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