尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法) 说明书

产品名称：尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)

有效期:6个月有效。低温运输，按要求保存。

产品简介:

尿素(Urea)又称碳酰胺(carbamide)，是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物，也是目前含氮量最高的氮肥;尿素检测方法大致分为化学方法和酶学方法后者被认为是间接方法，先经尿素酶(脲酶)分解尿素为铵离子，然后根据波氏反应检测铵离子的生成量。

尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)检测原理是尿素酶水解尿素，产生氨和二氧化碳，氨在碱性条件下与苯酚等反应生成蓝色吲哚酚，吲哚酚的生成量与尿素含量呈正比，通过分光光度计测定 560nm 处吸光度，可用于测定人体、动物的血浆、血清、尿液等样品中的尿素(旧称尿素氮，BUN)含量，但尿液最好经过处理后再行检测。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

操作步骤(仅供参考):

1、准备样品:

①血浆、血清:血浆、血清按照常规方法制备，直接用于尿素的测定，-20℃冻存。

②尿液:尿液样品最好处理后测定，方法如下:取 0.6ml 尿液样品，加入沸石 0.3g，加入无氨蒸馏水至 15ml，反复震荡数次，吸附尿液中的游离铵盐，静置后，吸取稀释尿液所测结果乘以 25，如果尿液比较少，可以等比例减少各试剂的使用量。举例:取 1ml，尿液样品，应加入沸石 0.5g，加入无氨蒸馏水至 25m，反复震荡数次，吸附尿液中的游离铵盐，静置后，吸取稀释尿液，所测结果乘以 25。

2、配制标准品工作液:取适量的尿素标准(100mmol/L)，按尿素标准(100mmol/L):ddH,0=1:19 的比例混合，使尿素浓度达到 5mmol/L，即为标准品工作液-尿素标准(5mmol/L);4℃℃保存，1 周有效。

3、配制脲酶工作液:取适量的脲酶溶液，按脲酶溶液:脲酶稀释液=1:99 的比例混合即为脲酶工作液;4℃避光保存，1个月有效。

4、Urea 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡;如果样品中的 Urea 浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

5、Urea 测定：充分混匀，37℃水浴20min，分光光度计检测560nm处吸光度，比色杯光径 1.0cm，空白管调零， 读取各管吸光度，分别为 A 标准、A 测定。

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